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  • 染色液

    Trpa染色液

    Trpa染色液

    貨號:B0032
    品牌:博爾夫生物
    價格:350
    規格:50次





    TRAP染色反應 抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)為破骨細胞的特異性標志酶,應用偶氮偶聯組化分析法酶活性部位顯示紅色反應。以萘酚二磷酸鹽為底物,偶氮副品紅為顯色劑,TRAP在酒石酸鉀鈉存在條件下將萘酚AS-BI磷酸鹽水解為萘酚AS-BI,與顯色劑結合形成紅色沉淀"。常用于破骨細胞染色。破骨細胞被染成酒紅色。



    1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來水漂洗,蒸餾水洗三遍。
    2、染液:A液:醋酸緩沖液
          B液:六偶氮副品紅(臨用前亞硝酸鈉(B1)與副品紅溶液(B2)等比例混合)
          注:副品紅4℃棕色瓶保存。
          C液:萘酚AS-BI磷酸鹽(C1)0.02g+NN-二甲基酰胺(C2)1ml
    孵育液配制:B液1ml+A液18ml+C液1ml混勻,再加酒石酸鉀鈉(D)0.282g,充分溶解即為TRAP孵育液。
    3、染色:切片用組化筆畫圈,滴加TRAP孵育液置于37℃孵育1-2h,蒸餾水洗,鏡下觀察破骨細胞呈酒紅色。
    4、蘇木素染細胞核:切片入蘇木素染1-3min,自來水洗,鹽酸水溶液分化數秒,自來水沖洗,氨水水溶液返藍,流水沖洗。
    5、脫水封片:切片依次放入無水乙醇I 5min -無水乙醇II 5min-無水乙醇Ⅲ5min -正丁醇5min-二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明,將切片從二甲苯拿出來稍晾干,中性樹膠封片。
    6、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。
    三、結果判讀:破骨細胞胞漿呈酒紅色,核淺藍色。



    4℃,保存一年。



    1、染液配制過程中需充分溶解,且染液要現配現用;
    2、蘇木素復染核淺染,以不影響陽性為原則。





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